13 лучших аптечных средств по уходу за кожей, по мнению дерматолога
May 02, 202413 ароматов для дома 2023 года, которые наполнят каждую комнату вашего дома
Jan 22, 202414 лучших корейских кремов для глаз 2023 года для увлажненной и упругой кожи под глазами, по мнению дерматологов
Jul 10, 202315 лучших ароматов для дома, которые сделают любую комнату чудесной
Jan 17, 202415 лучших кремов для глаз с ретинолом, которые разглаживают морщины и тонкие линии
Jun 13, 2024Разработка инновационной методики определения 6
Том 13 научных докладов, Номер статьи: 14172 (2023) Цитировать эту статью
3 Альтметрика
Подробности о метриках
6-Тиогуанин — иммунодепрессивный препарат, аналог гуанина, применяемый для лечения острых лейкозов и воспалительных заболеваний кишечника. Чрезмерное использование 6-тиогуанина во время клинического лечения может вызвать побочные эффекты. Более того, введение слишком низкой дозы будет неэффективным. Таким образом, существует острая необходимость в быстром, селективном и рутинном подходе к количественному определению 6-тиогуанина в жидкостях организма для поддержки клинического применения. Был разработан полностью валидированный метод ВЭЖХ для определения 6-тиогуанина в образцах цельной крови с использованием 5-бромурацила в качестве внутреннего стандарта. Нуклеотиды 6-тиогуанина высвобождались из эритроцитов под действием хлорной кислоты, а затем гидролизовались при 100 °C до исходного тиопурина, 6-тиогуанина. Были определены следующие параметры валидации метода: специфичность/селективность, диапазон линейности (479–17 118 нг/мл, R > 0,992), пределы обнаружения (150 нг/мл) и количественного определения (479 нг/мл), точность (- 5,6 <смещение < 14,7), повторяемость (CV 1,30–3,24%), промежуточная точность (CV 4,19–5,78%), степень извлечения (79,1–103,6%) и перенос. Кроме того, была исследована стабильность препарата в образцах цельной крови при различных условиях хранения. Предложенный метод пригоден для определения 6-тиогуанина в образцах эритроцитов цельной крови для контроля уровня лекарственного средства и, следовательно, правильного дозирования.
6-тиогуанин (6-ТГ) — пуриновый аналог гуанина; точнее, это серное производное гуанина1. 6-ТГ принадлежал к семейству тиопуринов и был введен в 1950 году для лечения лейкемии. Пятьдесят лет спустя врачи начали использовать его для лечения воспалительных заболеваний кишечника у тех, кто не получал азатиоприн (AZA) или меркаптопурин (MP) из-за побочных эффектов, ограничивающих дозировку, или субоптимального ответа2, 3. Однако возникли опасения по поводу профиля гепатотоксичности. затруднено из-за широкого использования, особенно узловой регенеративной гиперплазии (NRH)4. 6-ТГ также используется при клиническом лечении синдрома приобретенного иммунодефицита, аутоиммунных заболеваний, таких как псориаз, и химиотерапии острых лейкозов, особенно острого миелоидного лейкоза и острого лимфобластного лейкоза5, 6. Дополнительным риском, связанным с 6-ТГ, может быть развитие лимфома и рак кожи, как показано в случае терапии AZA/MP и анти-TNF7, 8. Поэтому важно регулярно проверять уровень 6-ТГ, чтобы подтвердить правильную дозу препарата или, в случае аномального результатов, корректировать дозу. Тиопурины, в том числе 6-ТГ, оказывают иммуносупрессивное действие за счет включения в нуклеиновые кислоты своих фармакологически активных метаболитов — 6-тиогуаниновых нуклеотидов (6-ТГН)9. Следовательно, это приводит к ингибированию пролиферации лимфоцитов, включая их важную роль в индукции апоптоза10. Хотя механизмы, вызывающие устойчивость лейкозных клеток к 6-тиогуанину, в настоящее время неправильно поняты11, было высказано предположение, что снижение или отсутствие активности гипоксантин-гуанинфосфорибозилтрансферазы (HGPT) вместе с измененной активностью тиопурин-S-метилтрансферазы (TPMT) стимулируют чувствительность и устойчивость к этому соединения12. Кроме того, было показано, что дефекты в системе репарации несоответствий ДНК стимулируют приобретенную устойчивость к многочисленным противораковым фармацевтическим соединениям, включая 6-тиогуанин13. Измерение уровней метаболита 6-ТГ в эритроцитах помогает определить адекватность дозировки AZA и может использоваться для оптимизации дозы антиметаболитной терапии для достижения улучшенного клинического ответа без индукции лейкопении14. Комбинация инфликсимаба и тиопуринов (например, 6-тиогуанина) у пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника более эффективна, чем монотерапия. Измерение активности ТПМТ рекомендуется перед началом лечения пациентов тиопуриновыми препаратами, такими как 6-тиогуанин, что позволяет корректировать дозу тиопурина или полностью отказаться от препарата15. У представителей многих этнических групп полиморфизмы ТПМТ приводят к снижению (10% распространенности) или отсутствию (0,3%) активности ТПМТ16. Лица, гомозиготные или гетерозиготные по этим типам генетических вариаций, могут иметь повышенные уровни метаболитов TGN, что увеличивает риск лекарственной токсичности для костного мозга из-за накопления неметаболизированного препарата17. Уровни 6-TGN, превышающие 230 пмоль/8 × 108 эритроцитов, были связаны с улучшением результатов лечения у пациентов, получающих монотерапию. Уровень 6-тиогуанина 125 пмоль/8 × 108 эритроцитов или выше может быть достаточным для достижения терапевтического уровня инфликсимаба18. Как правило, уровни 6-TGN, превышающие 235 пмоль/8 × 108 эритроцитов, рекомендуются в качестве терапевтического порогового уровня для пациентов, принимающих AZA или 6-MP19. Безопасный и терапевтический уровень составляет от 500 до 800 пмоль/8 × 108 эритроцитов20. Для терапии 6-ТГ у пациентов с ВЗК точные терапевтические или токсические уровни 6-ТГН пока не описаны. Однако гепатотоксичность, особенно узловая регенеративная гиперплазия (NRH) и веноокклюзионная болезнь (VOD), зависит от дозы и связана с уровнями 6-TGN выше 1000 пмоль/8 × 108 эритроцитов21. Чрезмерное использование 6-ТГ во время клинического лечения может иметь экстратоксические побочные эффекты6. Кроме того, недостаточная дозировка будет неэффективной. Таким образом, быстрый и полностью проверенный подход к количественному определению 6-ТГ в жидкостях организма имеет решающее значение для клинического использования. В настоящее время иммуноанализы и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) являются широко распространенными, практичными и чувствительными методами терапевтического мониторинга лекарственных средств22, 23.